Western Blotting

簡(jiǎn) 介:Western Blotting,又稱(chēng)蛋白免疫印跡技術(shù),該技術(shù)是檢測組織細胞中目的蛋白表達與否,以及目的蛋白表達水平差異的重要手段。

技術(shù)優(yōu)勢

(1)?????? 高質(zhì)量蛋白提?。?/span>高質(zhì)量蛋白提取是Western成功的關(guān)鍵,本公司采用特定的裂解液以及抑制劑能夠有效提取完整蛋白,尤其對較少樣品的提取具有豐富的經(jīng)驗。

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(2)????? 高分子量(>120 kDa)以及低分子量(<10 kDa)轉膜優(yōu)化:采用優(yōu)化的轉膜條件以及特有的轉膜緩沖液實(shí)現高分子量以及低分子量的有效轉膜。

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(3)????? 有效降低的雜交背景及非特異性雜交:本公司采用特定的Blocking Buffer以及完善的抗體優(yōu)化條件有效降低非特異性雜交反應和降低背景。

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(4)????? 極高靈敏度:本公司采用高靈敏度ECL試劑以及增強劑,對fg級別蛋白也具有較好的檢測效果。

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(5)????? 較為完善的抗體庫:本公司擁有較多的進(jìn)口抗體(Abcam;CST;Millipore; Sigma等公司),特別是信號途徑的關(guān)鍵抗體以及磷酸化抗體,大大減少了客戶(hù)抗體購買(mǎi)費用及節省時(shí)間。

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6)專(zhuān)業(yè)的光密度分析:本公司擁有非常準確的光密度分析軟件及經(jīng)驗,對光密度的采集及分析極為準確。

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客戶(hù)須知:

Western Blotting分析

周期

最終提供客戶(hù)資料

Western Blotting

10-14個(gè)工作日

原始WB檢測膠片(含顯影Marker,便于文章投稿使用)

高分辨率膠片掃描結果(客戶(hù)直接可以放在高水平文章上)

詳細實(shí)驗報告(操作流程及抗體信息)

光密度掃描分析(三次光密度掃描結果,便于客戶(hù)制備柱狀圖)

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案例:

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客戶(hù)提供:

樣品類(lèi)型

組織樣本

細胞樣品

樣品需要量

100 mg

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1-10×106個(gè)(相當于六孔板長(cháng)滿(mǎn)后的一個(gè)孔細胞量)

取樣和保存環(huán)境

新鮮組織:100 mg以上,液氮速凍;

凍存組織:-80 保存, 100 mg以上。

貼壁細胞:棄培養基,胰酶消化,離心(1000g,5 min),棄去上清;? 加入PBS重懸;然后離心(同上),棄上清;只保留細胞沉淀,凍存于-80 或干冰直接運輸。

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懸浮細胞:離心(1000g,5 min),棄去上清;加入PBS重懸;然后離心同上,棄上清;只保留細胞沉淀,凍存于-80 或干冰直接運輸。

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運輸

杭州市內干冰上門(mén)取樣;

外地客戶(hù)干冰快遞運輸。

杭州市內干冰上門(mén)取樣;

外地客戶(hù)干冰快遞運輸。

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*(經(jīng)本公司評估后,實(shí)驗沒(méi)有結果,不收取任何費用)

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