CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù)

BSPBisulfite Genomic Sequence)技術(shù)是提取的基因組DNA,經(jīng)過(guò)NaHSO3處理后,未甲基化CpG中“C”會(huì )轉換成“T”;而甲基化CpG中的“C”依然保持“C”,通過(guò)設計BSP引物,進(jìn)行PCR擴增,測序,從而確定CpG中甲基化數目及位置。目前主要用于啟動(dòng)子中CpG甲基化程度高低與基因表達之間的關(guān)系研究。

基本流程:

技術(shù)優(yōu)勢:

(1)?????? 本公司在未知基因啟動(dòng)子克隆方面,具有豐富的經(jīng)驗。目前已完成了團頭魴、蜥蜴、菊花、香草、中國對蝦、三疣梭子蟹等眾多的物種基因啟動(dòng)子調取工作,為分析CpG島以及CpG甲基化與表達調控研究打下基礎。

(2)?????? 目前,國內外試劑盒C-T轉換試劑盒的效率與實(shí)際宣傳有一定差距,本公司對試劑盒進(jìn)行了系統改進(jìn),使得C-T轉換效率達到99%以上。

(3)?????? BSP-PCR中最難的是引物的設計及優(yōu)化,本公司經(jīng)過(guò)多年的積累,在引物的設計方面具有極為豐富的經(jīng)驗。

客戶(hù)須知:

CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù)

周期

最終提供客戶(hù)資料

CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù)

14-21個(gè)工作日,視樣品和基因數目而定。

詳細實(shí)驗總結報告(包括基因組DNA提取、C-T轉換、PCR擴增、電泳、測序、BiQAnalyzer分析結果等)。

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案例

本實(shí)驗,首先通過(guò)啟動(dòng)子克隆技術(shù)分別獲取甘肅鼢鼠和高原鼢鼠某基因上游的啟動(dòng)子,通過(guò)http://www.urogene.org/cgi-bin/methprimer/methprimer.cgi在線(xiàn)尋找該啟動(dòng)子的CpG區域,然后通過(guò)對BSP-PCR技術(shù)對不同海拔該基因啟動(dòng)子甲基化程度進(jìn)行分析,從中找到膚色變化與該基因啟動(dòng)子甲基化程度的關(guān)系,部分實(shí)驗結果如下:

客戶(hù)提供:

樣品類(lèi)型

組織樣本

細胞樣品

基因組DNA

樣品需要量

100 -200 mg

5-10×106個(gè)

2.0 ug

取樣和保存環(huán)境

新鮮;-80℃凍存或存于組織保存液中

新鮮;-80℃凍存或存于組織保存液中

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運輸

杭州市內干冰上門(mén)取樣;

外地客戶(hù)干冰快遞運輸。

杭州市內干冰上門(mén)取樣;

外地客戶(hù)干冰快遞運輸。

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杭州市內干冰上門(mén)取樣;

外地客戶(hù)干冰快遞運輸。

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*(經(jīng)本公司評估后,實(shí)驗沒(méi)有結果,不收取任何費用)

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