BSP(Bisulfite Genomic Sequence)技術(shù)是提取的基因組DNA,經(jīng)過(guò)NaHSO3處理后,未甲基化CpG中“C”會(huì )轉換成“T”;而甲基化CpG中的“C”依然保持“C”,通過(guò)設計BSP引物,進(jìn)行PCR擴增,測序,從而確定CpG中甲基化數目及位置。目前主要用于啟動(dòng)子中CpG甲基化程度高低與基因表達之間的關(guān)系研究。
基本流程:
技術(shù)優(yōu)勢:
(1)?????? 本公司在未知基因啟動(dòng)子克隆方面,具有豐富的經(jīng)驗。目前已完成了團頭魴、蜥蜴、菊花、香草、中國對蝦、三疣梭子蟹等眾多的物種基因啟動(dòng)子調取工作,為分析CpG島以及CpG甲基化與表達調控研究打下基礎。
(2)?????? 目前,國內外試劑盒C-T轉換試劑盒的效率與實(shí)際宣傳有一定差距,本公司對試劑盒進(jìn)行了系統改進(jìn),使得C-T轉換效率達到99%以上。
(3)?????? BSP-PCR中最難的是引物的設計及優(yōu)化,本公司經(jīng)過(guò)多年的積累,在引物的設計方面具有極為豐富的經(jīng)驗。
客戶(hù)須知:
CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù) |
周期 |
最終提供客戶(hù)資料 |
CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù) |
14-21個(gè)工作日,視樣品和基因數目而定。 |
詳細實(shí)驗總結報告(包括基因組DNA提取、C-T轉換、PCR擴增、電泳、測序、BiQAnalyzer分析結果等)。 ? |
?
案例:
本實(shí)驗,首先通過(guò)啟動(dòng)子克隆技術(shù)分別獲取甘肅鼢鼠和高原鼢鼠某基因上游的啟動(dòng)子,通過(guò)http://www.urogene.org/cgi-bin/methprimer/methprimer.cgi在線(xiàn)尋找該啟動(dòng)子的CpG區域,然后通過(guò)對BSP-PCR技術(shù)對不同海拔該基因啟動(dòng)子甲基化程度進(jìn)行分析,從中找到膚色變化與該基因啟動(dòng)子甲基化程度的關(guān)系,部分實(shí)驗結果如下:
客戶(hù)提供:
樣品類(lèi)型 |
組織樣本 |
細胞樣品 |
基因組DNA |
樣品需要量 |
≥100 -200 mg |
≥5-10×106個(gè) |
≥2.0 ug |
取樣和保存環(huán)境 |
新鮮;-80℃凍存或存于組織保存液中 |
新鮮;-80℃凍存或存于組織保存液中 ? |
? |
運輸 |
杭州市內干冰上門(mén)取樣; 外地客戶(hù)干冰快遞運輸。 |
杭州市內干冰上門(mén)取樣; 外地客戶(hù)干冰快遞運輸。 ? |
杭州市內干冰上門(mén)取樣; 外地客戶(hù)干冰快遞運輸。 ? |
*(經(jīng)本公司評估后,實(shí)驗沒(méi)有結果,不收取任何費用)
?
?
?