簡(jiǎn)介:基因調控序列(如:?jiǎn)?dòng)子)的獲取,是研究基因表達調控的關(guān)鍵所在,也是表觀(guān)遺傳學(xué)研究的熱點(diǎn)(如:CpG甲基化研究)
技術(shù)優(yōu)勢:
(1)較長(cháng)調控序列的獲?。?/span>采用多種酶切反應的優(yōu)化以及高效的PCR擴增體系,能夠獲取從轉錄起始點(diǎn)上游至少1kb的調控序列。
(2)調控序列調取的高效性:該技術(shù)不同于目前其他啟動(dòng)子調取方法,通過(guò)接頭和目的基因設計引物進(jìn)行PCR擴增,同時(shí)在PCR過(guò)程引入了單引物擴增抑制手段,有效實(shí)現了調控序列的獲取,本技術(shù)在團頭魴、蜥蜴、菊花、香草、中國對蝦、三疣梭子蟹等眾多的物種基因中完成調控序列的調取工作。
客戶(hù)須知:
調控序列克隆 |
周期 |
最終提供客戶(hù)資料 |
基因5-UTR獲取 |
10個(gè)工作日 |
詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等 |
基因5-UTR在基因組上結構 |
10個(gè)工作日 |
詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等 |
調控序列獲?。◤霓D錄起點(diǎn)上游至少1kb) |
14-20個(gè)工作日 |
詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等 |
案 例
圖:采用本公司技術(shù)成功獲取了菊花某基因上游的調控序列
(SmaI和StuI接近3000 bp)
通過(guò)對獲取的調控序列,進(jìn)行CpG區域的預測分析:
這為研究CpG甲基化程度高低與基因表達調控直接的關(guān)系提供了有效思路。
客戶(hù)提供:
樣品類(lèi)型 |
組織樣本 |
細胞樣品 |
樣品需要量 |
≥200 mg
|
≥1-10×106個(gè)(相當于六孔板長(cháng)滿(mǎn)后的一個(gè)孔細胞量) |
取樣和保存環(huán)境 |
新鮮或凍存組織(最好放在-80℃) |
胰酶消化→離心(1000rpm, 5min)→PBS重懸→再次離心,棄去PBS,保留細胞沉淀,放置于-80℃ |
運輸 |
杭州市內干冰上門(mén)取樣; 外地客戶(hù)干冰快遞運輸; 組織保存液,冰袋運輸 |
杭州市內干冰上門(mén)取樣; 外地客戶(hù)干冰快遞運輸; |
*(經(jīng)本公司評估后,實(shí)驗沒(méi)有結果,不收取任何費用)